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首先是进行dNA扩增,对目标序列进行扩增,这个扩增方法一般使用的是聚合酶链反应,也就是众所周知的pcR。
pcR的原理非常简单,有点类似于数学里的1+1=2。
这两个1分别是dNA模板与引物,加号则是dNA聚合酶,等号则象征着循环反应。
得到的结果则是大量的目标序列。
其次则是准备载体dNA,选择一个合适的载体dNA,一般都是质粒或噬菌体什么的。
重复之前的操作,对载体dNA进行增强扩增。
然后,取出经过pcR扩增的载体dNA和与目标序列扩增后的dNA片段,用相同的限制性内切酶对它们进行切割。
在这个过程中,载体dNA和目标dNA片段会与限制性内切酶产生催化作用。
酶将这些dNA切割成互补的粘性末端,这会方便后续步骤中进行进一步的连接。
再然后,则是利用dNA连接酶将目标序列与载体dNA连接在一起。
在这个过程中,dNA连接酶的作用是催化目标序列与载体dNA发生连接反应。
连接后的dNA会重新形成一个环状dNA分子,也被称之为重组质粒。
最后的操作则是进行转化,将重组质粒转化到宿主细胞中,转化的方法一般是热冲击法或电击法。
在转化过程中,细胞会吸收这个外源性dNA,并将其整合到自己的染色体中。
这个操作结束后,如果没有意外的话,就会得到与目标序列重组的宿主细胞。
但学术研究没有如果和意外。
所以,还需要用选择性培养基培养或荧光报告基因检测等方式进行一次筛选。
dNA重组试验,从研究生甚至是本科生阶段就开始接触了。
安德森对此并不陌生,甚至颇为熟悉,不然也不会被冯尔诺选入实验小组里。
他的实验操作水平或许没有兰德全面,但单就dNA重组实验而言,他还是相当得心应手的。
不过,此时看着陆时羡极具美感且毫无停顿的操作手法。
安德森整个人都傻了。
他无法想象居然还有人把实验当作是锻炼时的固定动作一样。
难道中途不需要停下来思考的吗?
陆时羡如果能听到他心里的声音,一定会回答,这可是他之前用来安身立命的本钱。
都是一群打工的,为啥他熬出头了?
还不是因为做的太多了,都形成了肌肉记忆。
很快,就来到了最后的转化实验。
过了一会。
“应该是没啥大问题,不过只要是实验,就存在失败的情况,下面的筛选你来搞吧。”陆时羡一边说着,一边将实验台重新让出来问道:“冯尔诺教授在里面吧?”
“我找他有点事情,就先走一步了。”
走到换衣间,脱下白大褂。
长时间地专注让陆时羡不由得按了按太阳穴。
从这里出来,他来到一间办公室地门外。
轻轻敲了敲门,从里面听见冯尔诺的声音。
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