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唐欣接受完采访之后,回到她的私人实验室,就觉得少了点什么,她仔细一观察,哦,原来是少了一块牌匾。
她想到陈岩说的新星这个名字还不错,就直接吩咐夏东海,“老夏,你去订做了一块“新星工坊”的牌子,拿回来就挂在大门旁边,接下来不要打扰我,我需要完成最后一篇论文。”
“是。”夏东海回到办公室拿了钱,出去找木工雕刻的地方雕牌匾。
唐欣回到她在实验楼的书房,坐下翻看钟院士上次给她的调查报告,她发现国内在去年,乙型脑炎的发病率高达30,000例,感染的全都是儿童。
近十年来,竟有四五十万的新生儿感染乙脑病毒,死亡率还很高。
全世界有近10亿人口生活在乙型脑炎流行区,该地区每年新生儿就超过5,000万,被感染的风险很大。
在亜洲的病毒性脑炎中,乙型脑炎是最严重的疾病,每年至少引起500,000临床病例和1000,000例病死,绝大多数发生于儿童中。
在最近十年中,乙型脑炎的数起暴发流行感染地区,越来越向曾经是非流行的地区扩大。
同时伴随很高的病死率和严重的持久性神经系统后遗症。
乙型脑炎是由乙型脑炎病毒所致的中枢神经系统急性感染病。
常在夏秋季流行,以10岁以下儿童多见,症状轻重不一,轻者无明显症状,重者可出现高热、惊厥、昏迷,重症者病后常留有后遗症。
因而在亚洲很多国家和地区,乙型脑炎成为严重的公共健康问题。
唐欣也是在看了这个调查结果才选择研制预防乙脑病毒感染的疫苗。
据她从那些医学杂志中所了解的乙型脑炎传染途径中,蚊子是乙脑病毒的主要传播媒介,猪是主要中间宿主,人因被带毒的蚊虫叮咬而感染。
目前还没有治疗乙型脑炎疾病的特效药物,从环境方面控制其传播的效果不理想。乙型脑炎疫苗的免疫接种是控制乙型脑炎疾病最为经济有效的措施。
这个实验她一个人来弄很有点耗时间。
她直接去找了学校生物医学实验室的那些学长学姐帮忙。
只是这些学长学姐也很忙,在实验室里也各有各的工作。
那就没办法了,唐欣只好自己来,论文很简单,只花了一个星期就搞定,谁让她看过的医学杂志太多,对乙脑疫苗大概实验流程有一定的了解。
只是缺乏详细数据支撑,唐欣已经准备好所有所需材料。
唐欣先是找钟院士帮忙拿到国家批准的乙型脑炎病毒。
经过对乙脑病毒的实验了解,病毒颗粒呈二十面体对称结构,直径45-50nm,病毒颗粒由核心、包膜和刺突组成,属黄病毒的一种。
基因为正链单股RNA,RNA包被于多肽的衣壳C中,组成病毒颗粒的核心。
其包膜中有糖基化蛋白E和非糖基化蛋白prMM。
经过无菌试验,鉴别试验,从乙型脑炎病毒中挑选出SA14株、SA14-14-2株、P3株或Nakayama株,病毒滴定检定合格,这几种毒株才可作为生产毒种。
在制备过程中病毒培养所用的细胞,唐欣没用地鼠肾和脑,这两种制作出的疫苗对接种者都具有一定风险性。
她打算制备出人二倍体细胞来进行实验。
唐欣完成的关于研发乙脑疫苗的论文,钟院士已经看完了,对她的这个设想还是很感兴趣。特意来了新星实验室参观,还在她的实验室待了几天。
眼看着唐欣在以细胞培养液为DMEM,加入4~10%的无外源因子感染的胎牛血清,浓度100~200Uml的庆大霉素,调pH至7.0~8.0之间。
细胞用柯氏瓶培养在三十六摄氏度的温度之间,然后培养五天左右。
直到培养成致密的单层细胞后,以一比二的比例扩增,再继续培养三天左右,细胞长成致密的单层细胞。
这时,唐欣弃去细胞培养液,并用pH7.0~8.0的磷酸盐缓冲液淋洗细胞表面,洗掉残留的牛血清。
经过几次反复的实验,唐欣就得到实验所需的人二倍体细胞2BS、MRC-5、KMB-17、WI-38,准备用于病毒接种。
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